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¿Qué es el diagnóstico preimplantacional en la FIV y qué muestra?

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En esta sección aprenderás:

Preparándose para someterse al procedimiento de fertilización in vitro (FIV), cada mujer o pareja casada tiene un cierto temor asociado con la salud del feto. De hecho, nadie puede predecir cómo se producirá la fertilización y qué tan saludable resultará el embrión. Incluso algunas parejas absolutamente sanas (su proporción es del 5%) después de la concepción, un niño con una enfermedad genética o anomalías cromosómicas puede nacer de forma natural, lo que incluso las evaluaciones prenatales a veces no pueden revelar.

Afortunadamente, hoy en día existen técnicas que le permiten identificar violaciones en la estructura del embrión en los primeros días de su desarrollo. En primer lugar, se trata del diagnóstico genético preimplantacional en la FIV. Consideremos con más detalle cuál es exactamente la esencia de tal estudio.

Del nombre del procedimiento ya está claro que este diagnóstico genético se realiza antes de la implantación del embrión, que se concibió extracorpóricamente, en el útero de la mujer. Con la concepción natural PGD no se lleva a cabo.

El análisis de PGD en la FIV es una investigación de alta tecnología que se lleva a cabo en el momento más temprano del desarrollo del embrión: el tercer o quinto día. El propósito principal del procedimiento es seleccionar un embrión absolutamente sano para replantarlo en el útero. Este análisis se lleva a cabo en una pequeña cantidad de material biológico y se debe realizar en poco tiempo.

También es importante tener en cuenta que PGD debe tener indicaciones apropiadas.:

  • La edad de la futura madre es mayor de 35 años.
  • La edad del futuro padre es mayor de 45 años.
  • en la familia de uno o ambos futuros padres, las mismas enfermedades oncológicas o genéticas se transmiten de generación en generación,
  • la presencia en la historia clínica de la madre de la muerte del feto (o bebé recién nacido) debido a un conflicto Rh,
  • aborto involuntario habitual (abortos espontáneos o detener el desarrollo del embrión en el embarazo temprano),
  • intentos fallidos de FIV (más de tres)
  • espermogramas masculinos bajos (espermatogénesis alterada, bajo conteo de espermatozoides en el líquido seminal, alto conteo de espermatozoides con estructura anormal).

La PGD permite detectar anomalías cromosómicas y enfermedades genéticas en el embrión. No se excluye que después de los diagnósticos PGD (PGD) durante la FIV de varios embriones resultantes, la replantación se cancelará completamente debido a su mala calidad (esto puede suceder por varias razones). Cuanto mayor es la mujer, mayor es el porcentaje de rechazo de embriones.

Un estudio como el PGD es en parte una alternativa al diagnóstico prenatal, pero no puede, por supuesto, reemplazarlo por completo. Las mujeres que quedan embarazadas después de la FIV con PGD, así como todas las demás, deben someterse a exámenes de ultrasonido de rutina y otros exámenes para monitorear el desarrollo intrauterino del bebé.

Cabe añadir que hoy en día hay pocos centros en Rusia, donde se evalúan diferentes tipos de genotipos de embriones utilizando el método de diagnóstico genético preimplantacional de PGD en la FIV: en San Petersburgo es el centro de reproducción Génesis. El equipo de alta tecnología, la calificación y la práctica a largo plazo de los médicos embriólogos, los especialistas en reproducción y los genetistas permiten a las parejas infértiles convertirse en padres felices de un niño sano.

PGD ​​- ¿Qué es?

Desde el momento en que el óvulo de una mujer se fusiona con el espermatozoide de un hombre, todo está predeterminado a nivel genético: el color del cabello y el crecimiento, la capacidad intelectual y el género del niño, así como las posibles anomalías genéticas y enfermedades que el niño heredó de los padres, abuelos u otros parientes. .

Los diagnósticos previos a la implantación son un complejo de estudios genómicos que permiten identificar en el embrión, que tiene solo unos pocos días, varias desviaciones del desarrollo, enfermedades, síndromes y otros problemas. PGD ​​es capaz de identificar alrededor de 150 enfermedades genéticas hereditarias, entre las cuales son bastante comunes (síndrome de Down, Turner y bastante raras): fibrosis quística, hemofilia, síndrome del ala de mariposa, etc.

Usando técnicas especiales y equipos de alta precisión, los embriones enfermos son determinados y eliminados. Para el trasplante en la cavidad uterina, las mujeres usan solo embriones de alta calidad, sanos y viables.

La FIV estándar no incluye la etapa obligatoria del diagnóstico preimplantacional. Después de la fertilización y el cultivo de embriones durante varios días, solo se evalúan las tasas de crecimiento, las tasas de aplastamiento y la viabilidad de los embriones. Después de eso, se transfieren a la cavidad uterina de la mujer. Cuál de ellos tendrá su raíz y su raíz es una gran pregunta. La efectividad de la FIV estándar es de alrededor del 35%.

Si se realizan diagnósticos previos a la implantación, es posible que los futuros padres no se preocupen por el estado de salud del bebé, incluso si ellos mismos tienen ciertos problemas genéticos. Además, la efectividad de la FIV con PGD es algo mayor: alrededor del 40-45%. Esto se debe al hecho de que un gran embrión, incluso si se implanta en el útero, tiene muy pocas posibilidades de desarrollo y supervivencia. Un embrión sano y examinado tiene más probabilidades de afianzarse y comenzar a crecer y desarrollarse.

Propósito de la encuesta

PGD ​​se recomienda encarecidamente a los padres que tienen enfermedades genéticas que pueden ser heredadas por un bebé. Además, tal examen genético preliminar de embriones no sería perjudicial si hubiera enfermedades hereditarias en las filas de parientes cercanos de los futuros padres.

El diagnóstico antes de la implantación es importante y necesario para las parejas en las que uno de los padres es portador de la enfermedad relacionada con el cromosoma sexual. Por ejemplo, una mujer es portadora de un gen de la hemofilia, pero un niño solo estará enfermo si es un bebé varón. En este caso, la PGD determina el sexo de los embriones que tienen solo unos pocos días, y los médicos seleccionan únicamente los embriones que no están amenazados con hemofilia, es decir, las niñas, para replantar.

Una mujer con un factor Rh negativo y varios embarazos en el pasado (no importa cómo terminaron), se recomienda PGD, si el esperma de un marido con un factor Rh positivo se utilizó para la fertilización in vitro. En este caso, los médicos seleccionarán de todos los embriones resultantes solo aquellos que heredaron la identidad materna de Rhesus. En este caso, el embarazo después de la FIV procederá con menos riesgo, y el bebé no estará en riesgo de enfermedad hemolítica.

El PGD se recomienda para una pareja si una mujer ha tenido dos o más abortos involuntarios antes, si ha habido casos de aborto fallido, y también si alguno de los cónyuges en el primer matrimonio o juntos tienen un hijo con anomalías cromosómicas o Patologías genéticas. Los diagnósticos antes de la transferencia permiten excluir del número de embriones considerados para trasplante a los enfermos o con anomalías de origen no genético.

Los diagnósticos previos a la implantación en el segundo o tercer protocolo de FIV permiten establecer con alta precisión las causas de los intentos anteriores fallidos.

Y una situación totalmente no estándar, pero, por desgracia, real: los padres acuden a la FIV para tener un bebé que puede convertirse en donante, por ejemplo, de la médula ósea, para su propio hermano o hermana. En este caso, confiar en la concepción natural es demasiado arriesgado. Un niño nacido puede no ser adecuado como donante para un familiar enfermo.

Los diagnósticos previos a la implantación ayudarán a seleccionar individuos de los embriones resultantes con una cierta combinación de información genética que garantiza la coincidencia genómica entre los niños. Este estudio se llama tipificación HLA.

¿Qué muestra la encuesta?

El diagnóstico genético previo a la implantación le permite identificar previamente diversas enfermedades y afecciones en las que un niño puede ser inviable o discapacitado. Todo depende de las recomendaciones dadas por el genetista. Si es necesario, los embriones se examinan solo para ciertos criterios y mutaciones genéticas, pero en general existe la posibilidad de estimar todos los parámetros determinados por el estudio.

Por ejemplo, la PGD con una precisión del 97-99% determina la ceguera y la sordera, la sordera congénita, el retinoblastoma, la anemia de Fanconi, la neurofibromatosis, la fenilcetonuria, la miopatía, la distonía de torsión, la distrofia muscular de Duchene y varias otras enfermedades y síndromes peligrosos e incurables.

La PGD también determina el cariotipo del embrión, su grupo sanguíneo y el factor Rh, el género, la presencia de mutaciones a nivel genético, inusual para los padres y se manifiesta por primera vez.

¿A quién se prescribe?

Dado que el diagnóstico de preimplantación en sí no es un placer barato. No todas las mujeres que se han atrevido a la fertilización in vitro, se recomienda este paso adicional. Se ofrece a todos, pero hay categorías de pacientes que son altamente indeseables para rechazar la evaluación genética preliminar de los embriones antes de la transferencia al útero.

Estos pacientes incluyen:

  • "Edad": mujeres y parejas. Con la edad, las células sexuales masculinas y femeninas envejecen y pierden su salud. Bajo la influencia de las drogas, los malos hábitos, la ecología desfavorable y los últimos años, su conjunto de ADN puede mutar. Por lo tanto, en mujeres y hombres “relacionados con la edad”, los riesgos de anomalías cromosómicas fetales son mayores. PGD ​​es muy recomendable para mujeres mayores de 35 años, así como para parejas en las que un hombre tiene más de 40 años.
  • Mujeres Rh negativasQuienes tuvieron abortos, abortos involuntarios, partos, nacieron niños con enfermedad hemolítica. El diagnóstico es relevante solo si el cónyuge tiene un factor sanguíneo Rhesus positivo. Si se utiliza el esperma donante, el biomaterial masculino se selecciona inicialmente con un factor Rh negativo, entonces la probabilidad de obtener embriones Rh positivos es cero.
  • Mujeres que ya tienen una experiencia de 1-2 intentos fallidos de FIV En ausencia de razones objetivas (los protocolos se realizaron correctamente y sin complicaciones, no existe endometriosis ni otras barreras para la implantación).
  • Si el esperma masculino se utiliza para la fertilización con indicadores de baja calidad del esperma (teratozoospermia, azoospermia, astenozoospermia). Con la concepción natural, los espermatozoides de baja calidad mueren, no tienen posibilidad de fertilización, con la FIV pueden fertilizar bien el óvulo, ya que la selección natural se ve afectada, lo que puede llevar al desarrollo de diversas patologías en el feto.

Tipos de diagnósticos

Existen varios tipos de diagnóstico genético de embriones. Se diferencian en términos de investigación, matices técnicos, equipamiento y métodos de investigación. Enumeramos los principales sin entrar en detalles de laboratorio y genéticos:

  • El pescado - Este es un método de hibridación fluorescente. Este es un estudio bastante estándar, cuyo costo es bajo en comparación con otros métodos de diagnóstico preimplantacional. Pero su precisión es algo menor que la de otros métodos. Este método es ampliamente utilizado en clínicas en Rusia, Ucrania y Bielorrusia. Las clínicas extranjeras prácticamente lo abandonaron debido a que aparecieron estudios más precisos. Más el hecho de que el estudio se realiza rápidamente, en unas pocas horas. El inconveniente es que muchos cromosomas ni siquiera están siendo investigados.
  • CGH - Método de hibridación genómica comparativa. Manera muy cara. Y tanto a nivel financiero como temporal. Pero la lista de patologías identificadas es mayor que la del método descrito anteriormente, y la precisión es inmensamente mayor. Entre otras cosas, este método de diagnóstico antes de la replantación le permite determinar qué embriones tienen mayores posibilidades de implantación.
  • PCR - Método de reacción en cadena de la polimerasa. Revela la identidad de Rhesus del embrión, su grupo sanguíneo, así como una lista bastante grande de problemas genéticos. El estudio requiere un examen preliminar obligatorio de los padres biológicos para detectar mutaciones genéticas. Si una mujer recibe un donante, se toman óvulos de embrión o de donante para la fertilización, no se puede usar el método de PCR.
  • Ngs - Método de secuenciación. Este es un método moderno de diagnóstico de preimplantación, que combina lo mejor de todo lo mencionado anteriormente. Sin embargo, proporciona la imagen más completa del estado de salud de los embriones y su costo es mayor que el de otros métodos.

¿Cómo va la investigación?

Para que los embriólogos y genetistas tengan la capacidad de realizar PGD, se debe obtener un número suficiente de óvulos mediante la estimulación hormonal previa. Si es inferior a 3-4, el diagnóstico de preimplantación no suele realizarse. Después de que los médicos "arreglan" una reunión de los óvulos con esperma purificado, el desarrollo de los embriones se monitorea durante 2 a 5 días. Entonces el embriólogo puede seleccionar el más viable. En el quinto día, los blastocistos ya tienen alrededor de 200 células. Es posible, sin perjuicio del embrión, tomar aproximadamente 5-7 células de cada embrión para la investigación genética.

Se utilizan láseres modernos de alta precisión para recolectar células, se realizan biopsias de las células y se utilizan otros métodos. Una encuesta de cadenas de ADN proporciona información completa sobre si el embrión está sano. Después de lo cual se recomienda para la transferencia.

Si la pareja está de acuerdo con el diagnóstico genético preliminar de los embriones, la transferencia de embriones en sí puede retrasarse. Si con el protocolo estándar de FIV se lleva a cabo durante 2, 3 o 5 días desde el momento de la fertilización, los resultados de PGD se pueden esperar de varias horas a 5-6 días. Así, el ciclo de la FIV se prolonga al menos una semana. El costo del protocolo puede aumentar en caso de consentimiento para el diagnóstico preliminar de embriones en 40-240 mil rublos.

Todo depende de cuántos embriones planee examinar, qué método de los anteriores se probará.

Para reducir los costos, una pareja puede usar herramientas de cuota, el diagnóstico se incluye en la lista de servicios que puede proporcionar la OMS, pero cada clínica debe aclarar este problema por separado. Algunos hacen PGD a expensas del presupuesto, otros no.

Posibles complicaciones

Como ya se mencionó, el material para el estudio de la genética se obtiene mediante biopsia. A pesar del equipo de precisión ultramoderno, todavía existe la posibilidad de lesiones al feto durante este procedimiento. La mayoría de las personas lesionadas están sujetas a "tres días". Cabe señalar que la probabilidad de lesión es bastante baja, alrededor del 3%, y los beneficios del estudio serán mucho mayores. De lo contrario, las complicaciones con esta FIV pueden ser las mismas que con la FIV en un protocolo estándar.

Cualquiera de las etapas de la fertilización in vitro puede estar asociada con ciertos riesgos, y esto no irá a ninguna parte. Es importante que todos los riesgos sean bajos.

La pareja debe ser consciente de que incluso los instrumentos modernos y precisos con los que trabajan los médicos de la categoría de calificación más alta no garantizan al 100% que el bebé estará sano. Así, con un extenso mosaicismo, pueden ocurrir errores biológicos y un embrión enfermo puede ser transferido a una mujer. Esta probabilidad es, pero es muy pequeña, no más del 0.05%.

Según la información oficial de la Organización Mundial de la Salud, la FIV con PGD aumenta la probabilidad de éxito del protocolo en aproximadamente un 7-10% en relación con la base del 35%. Sin embargo, no hay tantas revisiones positivas en el segmento ruso de Internet sobre los diagnósticos previos a la implantación.

Algunas mujeres notan que la tasa de supervivencia de los embriones a partir de los cuales se tomaron las células para el análisis es algo peor, y por lo tanto hay bastantes revisiones de protocolos de FIV sin éxito con diagnóstico genético preliminar del feto. El medicamento no confirma esta opinión popular, y las estadísticas oficiales de las estadísticas no indican un porcentaje reducido de implantes exitosos después del examen de embriones.

A menudo, las mujeres preguntan si es posible hacer una PIO para elegir el sexo de un bebé, porque además del hecho de que realmente quiero tener hijos, todavía quiero un hijo o una hija. No existe una capacidad técnica para determinar el género, pero ningún médico puede seleccionar los embriones del género "innecesario", a menos que haya una indicación específica de la genética. (Para enfermedades ligadas al cromosoma sexual). La discriminación de los embriones por género está prohibida por la ley en Rusia.

Según las revisiones, el proceso de diagnóstico en sí mismo, que puede durar varios días, ofrece muchas experiencias a una mujer, porque no sabe hasta el final cuántos son los embriones de alta calidad y si resultaron. Помимо того, ей нужно поддерживать состояние эндометрия в нужной форме -принимать назначенные лекарства, сдавать кровь на прогестерон, делать несколько УЗИ, чтобы определить толщину функционального слоя матки. Это важно, чтобы перенос прошел максимально успешно и плодное яйцо смогло имлантироваться.

Случается, что пока идет диагностика, «удачное» для переноса время проходит. En este caso, el protocolo puede interrumpirse, y los embriones que han pasado la prueba se congelan y se envían al cryobank. Transferirlos estará en el próximo protocolo.

Acerca de las complejidades del diagnóstico genético preimplantacional, vea el siguiente video.

Revisor médico, especialista en psicosomática, madre de 4 hijos.

Que es PGD

El conjunto de cromosomas del óvulo o embrión se estudia en el laboratorio. Dado el desarrollo temprano del embrión, el riesgo de lesión se reduce al 1%. El procedimiento se prescribe en paralelo con el tratamiento principal proporcionado por el protocolo. Sin embargo, necesitará más folículos, por lo que la estimulación hormonal de los ovarios se lleva a cabo en un modo más intensivo.

No todas las mutaciones cromosómicas en los padres representan un peligro para la salud de su bebé. El desarrollo de la patología depende de los signos y la combinación de genes en mamá y papá.

Hay dos tipos de signos mutacionales: dominante y recesivo. La transmisión del gen mutante dominante al bebé aumenta el riesgo de patología en el niño en un 50%. Si los padres son portadores de un rasgo recesivo, entonces aparecerá una enfermedad genética cuando los dos genes “enfermos” de mamá y papá se transmitan al bebé.

Además, algunas patologías genéticas asociadas al sexo. Así, el par cromosómico femenino veintitrés se parece a XX, y el macho, como XY. Por lo tanto, las violaciones en un cromosoma de las mujeres no causarán la enfermedad, ya que el segundo bloqueará su acción. Un niño nacido sano continuará siendo el "portador" del cromosoma defectuoso.

Los hombres no cuentan con tal protección, por lo tanto, los niños los darán a luz con una patología genética y las niñas en la mitad de los casos se convertirán en portadoras de un cromosoma "defectuoso".

Usando el diagnóstico genético preimplantacional de los embriones, la genética establece una combinación específica que el embrión hereda. La información obtenida nos permite determinar si un niño nace con una patología o solo se convertirá en portador de un defecto cromosómico. Se investigan todos los embriones obtenidos de los cuales se seleccionan los más "puros".

Este análisis no debe confundirse con la selección genética previa a la implantación. La diferencia entre PGD y PGS es significativa. PGD ​​se realiza para identificar patologías genéticas incurables y minimizar los riesgos de tener un hijo enfermo. PGS es un estudio que le permite determinar el número de cromosomas, aneuploidía que es compatible con el nacimiento y el desarrollo fetal del embrión. En pocas palabras, la tarea de la ASG es aumentar las posibilidades de embarazo seleccionando embriones sanos. Los padres a los que se les prescribe PGS no tienen patologías de tipo hereditario, sin embargo, existe el riesgo de que ocurran.

Por lo tanto, el procedimiento de fertilización in vitro se lleva a cabo junto con PGD para tales fines:

  • "Prevenir" los embriones que tienen genes defectuosos para replantar,
  • Descubra las razones por las que los protocolos de FIV anteriores terminaron sin éxito,
  • Reducir el riesgo de tener un bebé con patología de los padres de acogida,
  • Determinar el sexo del bebé, eliminando las anomalías cromosómicas por género,
  • Identificar embriones que tengan predisposición a patologías de tipo genético,
  • "Encuentre" un embrión que sea óptimo con el sistema HLA con otros niños de una familia que puedan convertirse en donantes durante su tratamiento,
  • Reducir la probabilidad de aborto involuntario en las primeras etapas,
  • Reducir la posibilidad de enfermedad hemolítica,
  • Elija un embrión “ideal”, eliminando la posibilidad de embarazo múltiple.

Los diagnósticos genéticos pueden identificar y eliminar tales patologías peligrosas:

  • Enfermedad de Tay-Sachs,
  • Anemia de células falciformes,
  • Enfermedad de Gaucher,
  • Enfermedad de Verdnig-Hoffman,
  • Retinoblastoma,
  • Horey Huntington,
  • Síndrome de down,
  • Neurofibromatosis,
  • Hemofilia
  • Miopatía
  • Acondroplasia
  • Fenilcetonuria
  • Síndrome de Alpers,
  • Enfermedad renal poliquística
  • Distrofia muscular de Duchenne,
  • Retinitis pigmentosa,
  • Enfermedad de Gottington,
  • Dyodyen Myodystrophy,
  • Fibrosis quística
  • Anemia Fanconi,
  • Sordomudo
  • Distonía de torsión,
  • Pénfigo
  • Síndrome de Edwards.

Esta lista no se limita a las patologías presentadas: hay más de 150 tipos de ellas.

Tenga en cuenta que los casos de resultados falsos negativos se registran. El hecho es que algunos métodos de investigación diagnostican solo un cierto número de cromosomas. Los genes "no contabilizados" pueden ser defectuosos.

A veces hay un desarrollo de mosaico de mutaciones. Durante el estudio, la célula se diagnostica como sana y la mutación se produce durante su desarrollo.

¿Cuándo es necesario el PGD?

Ya hemos dicho que la PGD no se realiza a todos los pacientes que han solicitado la fertilización in vitro. Hay ciertas indicaciones para el procedimiento:

  • Los padres son portadores de defectos cromosómicos, por lo que el riesgo de transmitir las anomalías genéticas del bebé es muy alto. El "portador" proporciona la presencia de reordenación cromosómica o enfermedades monogénicas.
  • Categoría de edad de los padres: madres mayores de 36 años, padres cuya edad ha superado los 40 años. Cuanto más viejos son los cónyuges, mayores son los riesgos de desarrollar mutaciones genéticas, incluso si los futuros padres tienen el conjunto correcto de cromosomas.
  • Después de embarazos anteriores, nacieron niños que murieron de conflicto Rh.
  • Se han identificado genes y cromosomas defectuosos en los óvulos y el esperma.
  • El espermograma ha identificado anomalías graves en un hombre (patologías como la azoospermia u oligozoospermia),
  • Los intentos anteriores de quedar embarazada con FIV han sido infructuosos,
  • Los embarazos emergentes terminan en abortos involuntarios en las primeras etapas del desarrollo del embrión,

Dada la impresionante lista de enfermedades genéticas, la PGD para la FIV se realiza a todas las mujeres cuya edad ha superado los treinta y cinco años. Esto se debe a cambios relacionados con la edad que pueden traer "sorpresas" desagradables incluso durante el embarazo natural. El envejecimiento de los huevos se ve acelerado y exacerbado por tales factores:

  • Terapia a largo plazo con fármacos potentes.
  • Estilos de vida en el pasado asociados con el consumo de alcohol, nicotina, drogas,
  • Patología crónica,
  • Condiciones peligrosas de actividad profesional,
  • Mala ecología.

El diagnóstico genético se muestra en tales casos:

  • El nacimiento de un bebé se asocia con la obtención de células madre correctas compatibles con el sistema HLA para curar a un niño mayor,
  • Incompatibilidad del factor rhesus.
  • Los cónyuges son parientes cercanos,
  • La pareja fue expuesta a la radiación.

La FIV con PGD aumenta significativamente el costo del protocolo. Por lo tanto, una mujer decide independientemente sobre la necesidad de un estudio. Recuerde que la fertilización in vitro solo en el 20-40% de los casos termina con el embarazo. Un diagnóstico genético no solo identificará posibles mutaciones genéticas, sino que también aumentará significativamente las posibilidades de una concepción exitosa.

Preparación y realización de DGP con FIV.

La preparación para el diagnóstico genético preimplantacional de los embriones incluye la consulta y un examen completo de la pareja casada con las indicaciones apropiadas. El médico explica en detalle los pros y los contras del procedimiento. Se explica a la mujer que el diagnóstico genético requiere un mayor número de óvulos maduros. Por lo tanto, la estimulación hormonal de los ovarios se intensificará, lo que aumenta el riesgo de sobreestimulación durante la FIV. Después de todas las medidas de diagnóstico, proceda al procedimiento de PGD.

Consta de siete etapas:

  1. Extracción de huevos y su fertilización en el laboratorio.
  2. Desarrollo fetal que dura 3-5 días,
  3. Selección de los "mejores", los embriones más viables,
  4. Extracción de células de un embrión de biopsia,
  5. Blastómero de fijación,
  6. Hibridación,
  7. Decodificación de la información recibida.

Una vez más recordamos que el estudio no afectará la salud del embrión: los órganos y tejidos del feto "no participan" en el procedimiento.

Después del descifrado, el genetista separa embriones adecuados y "defectuosos". Si se detectan 2 cromosomas que cumplen con los estándares, entonces dichos embriones están sujetos a replantación. Los huevos en desarrollo con alteraciones anormales no pueden ser implantados.

Métodos de PGD

La tecnología reproductiva moderna realiza la PGD del embrión por 4 métodos:

Considere los detalles de cada técnica.

El método citogenético molecular es el segundo nombre del método. Es ampliamente utilizado en el espacio post-soviético, tiene el valor más democrático. Un inconveniente importante de la hibridación in situ fluorescente (pez) es la inexactitud del diagnóstico, ya que este método examina solo una parte de los cromosomas.

Para el método PGD el pescado tardará 5 horas. Durante este tiempo, el genetista determinará los siguientes factores importantes:

  • Secuencia cromosoma
  • Género bebe
  • La presencia de las anomalías genéticas más frecuentes.

El método se llama hibridación genómica comparativa. Tomará mucho más tiempo y costará más. Sin embargo, la técnica tiene una serie de ventajas importantes que la distinguen de otros tipos de investigación:

  • "Encuentra" los embriones más viables con el mejor potencial de implantación,
  • Analiza muchas células madre, lo que reduce significativamente los riesgos de hacer un diagnóstico incorrecto.
  • Las medidas de diagnóstico se realizan con huevos congelados que serán transferidos al crioprotocolo.

La PCR es una reacción en cadena de polímeros. Es capaz de "encontrar" no solo defectos en el funcionamiento de los cromosomas, sino también patologías monogénicas. Usando la PCR, se determinan los anticuerpos de la incompatibilidad de los padres y el Rhesus de los embriones.

Una condición importante antes de realizar un estudio es el diagnóstico obligatorio de los padres por la presencia de mutaciones genéticas. Dicho estudio eliminará los errores en el diagnóstico de patologías derivadas de la mutación de las células.

La FIV que utiliza un óvulo donante no permite el estudio por PCR.

La secuenciación de alto rendimiento es el método de diagnóstico más avanzado PGD. La secuenciación de generación actual es el diagnóstico genético más costoso y efectivo que le permite explorar los 23 pares de cromosomas. Se realiza el análisis genómico completo, ya que durante el estudio se examina la exactitud de la secuencia de ADN.

El coste del diagnóstico genético.

FIV requiere gastos serios. El diagnóstico genético aumenta el precio a veces, ya que el equipo y los materiales para el procedimiento son muy caros.

Es imposible dar una respuesta inequívoca a cuánto cuesta el PGD, ya que el precio del estudio depende de varios factores:

  • Metodo diagnostico
  • El número de embriones estudiados,
  • Usando pruebas extra,
  • Estudio de translocación de cromosomas.

El costo del diagnóstico depende del número de anomalías investigadas.

En Moscú, el costo de PGD por embrión es de 25,000 a 30,000 rublos. Para una encuesta exhaustiva, debe pagar de 100,000 a 250,000 rublos.

La relevancia del análisis PGD.

La principal ventaja de los diagnósticos de PGD es que todos los procedimientos médicos se llevan a cabo antes del embarazo, mientras que el feto todavía está fuera del útero. El análisis es relevante para parejas con un mayor riesgo de que los embriones presenten anomalías cromosómicas graves que causarán:

  • aborto involuntario
  • problemas con la implantación
  • desvanecimiento del embarazo
  • El nacimiento de un niño que tendrá discapacidades intelectuales o físicas.

Cita: "La PGD oportuna de los embriones ayuda a prevenir situaciones problemáticas, muchas veces aumenta las posibilidades de que el embarazo termine con el nacimiento de un bebé sano".

Marina V. Shapnevskaya, embrióloga de la Clínica "Para el nacimiento"

Curiosamente, la FIV con PGD permite planificar incluso el sexo del feto.


Recolección de células para análisis de PGD.

Indicaciones para PGD con FIV

No todas las parejas que deciden someterse a FIV, hacen diagnósticos de PGD. Existen estrictas indicaciones médicas para este tipo de investigación. Como regla general, los cónyuges que tienen un alto riesgo de transmitir desórdenes genéticos peligrosos a los niños se convierten en candidatos para el análisis de preimplantación.

Los principales objetivos de PGD en la FIV incluyen:

  • Cribado de embriones con alteraciones cariotípicas,
  • minimizando el riesgo de transferencia de embriones a la cavidad uterina, que tendrá anomalías genéticas,
  • Detección oportuna de embriones que tienen predisposición a trastornos genéticos severos,
  • establecer el sexo del feto para prevenir la transmisión de enfermedades relacionadas con el sexo,
  • determinación de las razones por las cuales la implantación no ocurrió en intentos previos de fertilización in vitro,
  • identificación del factor Rh del embrión para excluir el nacimiento de un niño con enfermedad hemolítica,
  • realizar la tipificación de HLA, si el futuro hijo debería convertirse en donante de un hermano o hermana mayor.

Investigación del material biológico recibido.

Las indicaciones para el diagnóstico del embrión antes de la FIV son:

  • La edad de la mujer es mayor de 35 años y el hombre mayor de 40 años.
  • anomalías de la espermatogénesis,
  • uno de los cónyuges es portador de patologías cromosómicas o genéticas en células germinales,
  • múltiples intentos fallidos de FIV,
  • aborto habitual en mujeres (si hay dos o más abortos involuntarios en la historia),
  • Muerte fetal durante un embarazo previo por conflicto Rh.

Métodos de diagnóstico genético preimplantación de embriones.

La FIV con PGD puede incluir solo huevos o embriones confeccionados. La última opción es más preferible, ya que es lo más informativa posible: solo hay material genético de una mujer en la célula del óvulo y ambos padres en el embrión.


El muestreo de material para el análisis de PGD se realiza generalmente el día 3

Durante el análisis, se realiza una biopsia de un blastómero en un embrión de cuatro a diez existentes que se encuentran en la etapa de escisión. Esto suele suceder en el tercer día. Las manipulaciones realizadas no afectan negativamente al futuro feto.

Cuando se comprueban los embriones (tarda hasta dos días), se transfieren a la cavidad uterina, como en el protocolo de FIV habitual. Es importante que la replantación se realice a más tardar en el quinto día del desarrollo del cuerpo humano.

Si se utiliza la crioconservación, entonces el potencial de diagnóstico de PGD es más amplio. Entonces, si toma una biopsia y luego preserva los embriones, puede realizar todos los estudios necesarios sin prisa y volver a plantar el siguiente ciclo.

Métodos para los embriones PGD

Existen varios métodos efectivos de diagnóstico de preimplantación:

  • El pescado Relevante si necesita excluir la presencia de anomalías cromosómicas estructurales o numéricas: translocaciones y aneuploidía. El material obtenido durante la biopsia se transfiere a un portaobjetos de vidrio, se calienta a una cierta temperatura y luego se enfría gradualmente. En este caso, la cáscara se rompe, sale el citoplasma. Los segmentos de ADN están marcados con tintes especiales - sondas fluorescentes. Después de eso, utilizando un microscopio de fluorescencia, un genetista puede contar la cantidad de cromosomas y verificar si hay alguno anormal entre ellos.
  • Ngs. Este es el método de diagnóstico de PGD más reciente en el cryocycle, mediante el cual puede examinar a fondo 23 pares de cromosomas. La precisión de los datos obtenidos con NGS es del 99.9%, es decir, los errores son poco probables. La tecnología también hace posible detectar anomalías cromosómicas y monogénicas, mutaciones, para distinguir la translocación de un conjunto cromosómico sano, eliminando así la necesidad de una biopsia del blastómero.
  • Reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Una técnica dirigida a identificar copias específicas de ADN. Para hacer esto, primero se desnaturaliza para desenrollar el hilo doble. Luego toman un fragmento, le agregan enzimas específicas y lentamente duplican la cantidad de material genético. Esto le permite al investigador ver las zonas de nucleótidos defectuosas. El método de PCR se muestra cuando es necesario excluir la transferencia de enfermedades monogénicas al niño (si uno de sus compañeros o ambos son portadores de genes poco saludables o tienen manifestaciones clínicas de una patología genética peligrosa).

Cabe señalar que los métodos de PGD en la FIV no son intercambiables al cien por cien. Cada uno de ellos está diseñado para identificar grupos específicos de enfermedades. Por lo tanto, solo un médico puede decidir cuál de los métodos es más adecuado para una pareja casada que lo haya solicitado.


PGD ​​- una garantía del nacimiento de un bebé sano

Embriones PGD - El costo de los servicios

PGD ​​de embriones para la FIV es un servicio bastante caro. En la clínica de Moscú "Para el nacimiento", su precio varía de 83.500 a 90.500 rublos. Este procedimiento es muy complejo e implica el uso de equipos costosos y consumibles innovadores. Para llevarlo a cabo sólo pueden los expertos del más alto nivel.

En la clínica “Para el nacimiento”.

El costo relativamente alto del diagnóstico genético antes de la implantación está asociado con la complejidad de las manipulaciones. Si realiza un seguimiento de las ofertas de clínicas especializadas, PGD se puede transmitir en términos más favorables.

El dinero pagado por los análisis de PGD siempre se paga a sí mismo; después de todo, está en juego el nacimiento de un niño sano. El tratamiento y mantenimiento de un bebé con anomalías genéticas graves les cuesta a los padres una cantidad mucho mayor.

¿Es peligrosa la FIV con PGD?

El diagnóstico genético preimplantacional se utiliza en todo el mundo. Ее безопасность научно доказана. Биопсия осуществляется только на том этапе развития эмбриона, когда его клетки еще не дифференцированы.Esto significa que con más aplastamiento, la célula eliminada será reemplazada por otras sin ninguna consecuencia para el futuro feto.

PGD ​​no aumenta la probabilidad de defectos de desarrollo en un niño, sino que, por el contrario, garantiza el nacimiento de un bebé sano.

Hicieron pgd en NGC en San Petersburgo, todo el protocolo también estaba allí. Mi esposo y yo somos viejos (38 y 40 años), muy preocupados! Y por una buena razón. El doctor Gvasalia dijo que en nuestro caso pgd es prácticamente un procedimiento obligatorio. Se verificaron cuatro embriones, el procedimiento reveló los más sanos: se plantaron dos. Creciendo durante dos meses. )
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Conceptos generales

El diagnóstico genético previo a la implantación permite un examen completo y excluir la presencia de anomalías cromosómicas en general o una desviación específica. Recientemente, en paralelo con defectos tempranos, se ha llevado a cabo la detección de genes que pueden provocar la aparición de tumores en la edad adulta (ovarios, intestinos, senos).

En el caso del transporte de enfermedades genómicas por parte de la madre, se realiza una biopsia de varios óvulos polares antes de la fertilización. Los métodos descritos son una alternativa al diagnóstico prenatal temprano, que le permite prevenir la interrupción del embarazo, si de repente el feto tendrá una patología genética.

El diagnóstico genético previo a la implantación le permite determinar el sexo del futuro bebé que ya se encuentra en el proceso de detección. Se utiliza para prevenir el desarrollo de anomalías relacionadas con el sexo.

¿Quién es examinado?

El diagnóstico genético preimplantacional (PGD) se realiza en los siguientes casos:

  1. La presencia de uno o ambos de un par de enfermedades hereditarias o cambios en el cariotipo. A menudo, los socios mismos conocen sus problemas, con menos frecuencia, lo descubrirán en el proceso de evaluación.
  2. Aborto involuntario habitual. El problema con esto no son las anomalías de los padres (puede que no lo sean), sino las mutaciones genéticas del feto que causan abortos espontáneos.
  3. La edad de las personas sometidas al programa de FIV es mayor de 38 años.
  4. Más de 3 intentos fallidos de fertilización in vitro en la historia.
  5. Infertilidad masculina.
  6. Inclusión de ICSI (inyección intracitoplásmica de esperma) en el programa de fertilización. El proceso está plagado del desarrollo de anomalías genéticas en el embrión.
  7. Casos de patinaje en la historia.

Características de PGD

La investigación en el campo del diagnóstico genético preimplantacional sugiere que el método tiene derecho a existir, ayuda a diagnosticar y prevenir anomalías cromosómicas, sin embargo, requiere una mejora adicional.

Las características PGD son las siguientes:

  • la tasa de aborto involuntario en la selección es menor que sin ella,
  • Actualmente no hay evidencia de que la posibilidad de embarazo aumente,
  • Existe la posibilidad de un resultado falso: el embrión está sano y el resultado muestra anomalías, el embrión está enfermo y el estudio sugiere lo contrario (5-10% de los casos).

Realización de diagnóstico genético preimplantación (examen de blastómeros).

Después del acuerdo sobre la fertilización in vitro, el reproductólogo evalúa la necesidad de PGD de la pareja casada. Si hay evidencia, los socios pueden acordar o rechazar el procedimiento. A continuación, se firma un documento que confirma el permiso para realizar la encuesta.

En el tercer día después de la fertilización del embrión, el genetista toma una de las células de blastómero formadas para su análisis. Se cree que esto no tiene efecto en el feto, ya que todas las células son intercambiables.

El especialista realiza investigaciones en una de las áreas previamente elegidas: el estudio de la estructura de la célula bajo un microscopio fluorescente especial, el estudio de ADN, utilizando el método de reacción en cadena de la polimerasa, para determinar la presencia de mutación.

Con base en el resultado, los embriones que tienen anomalías no se utilizarán en el proceso de implantación. Elegir sano y de calidad. Luego, uno o varios de ellos se transfieren a la cavidad uterina de la madre.

Con una biopsia del cuerpo polar, se examina el conjunto de cromosomas de la madre. Se lleva a cabo en el caso de que la línea femenina revelara la presencia de una patología genéticamente determinada. El procedimiento le permite determinar si el huevo está sano, que se usará para la fertilización, sin violar su estructura. Si no se identifican anomalías, se puede utilizar para la fertilización y la transferencia a la cavidad uterina.

Hay casos en que los cuerpos polares se tamizan y luego los blastómeros. Esto le permite obtener un resultado más confiable. El esquema según el cual se realizará el examen es elegido por un genetista.

Métodos utilizados

Los trastornos numéricos y estructurales de los cromosomas están determinados por el método de hibridación fluorescente. Este método le permite especificar la secuencia de ADN de la célula. Se utilizan sondas especiales de ADN que, en su estructura, son regiones complementarias para las zonas de ADN del blastómero.

La sonda contiene un nucleótido y un fluoróforo (una molécula capaz de fluorescencia). Después de la interacción del ADN objetivo con la sonda de ADN, se forman áreas iluminadas, que se observan bajo un microscopio fluorescente.

También usar el método de PCR (reacción en cadena de la polimerasa). Consiste en copiar una sección de ADN usando enzimas en ciertas condiciones de laboratorio.

Diagnóstico de la aneuploidía.

Este es uno de los métodos de diagnóstico genético preimplantacional, que permite detectar la presencia de anomalías cromosómicas numéricas (para determinar los cromosomas extra o faltantes).

El material genético consiste en 46 cromosomas, la mitad de los cuales los da el padre y la otra mitad la madre. Si el embrión recibe un cromosoma adicional, se llama trisomía y la pérdida de cualquier monosomía. Estos defectos pueden llevar a las siguientes consecuencias:

  • no implante embrionario
  • aborto espontáneo,
  • Patologías hereditarias (síndrome de Down, Klinefelter, Shereshevsky-Turner).

La infertilidad masculina y la edad de una pareja casada son factores frecuentes en el desarrollo de tales anomalías.

PGD ​​patologías monogénicas

El diagnóstico genético preimplantacional de embriones para determinar la presencia de enfermedades monogénicas se realiza en familias donde se establecen anomalías hereditarias. Si la pareja ya tiene un bebé con una enfermedad homogénea, la oportunidad de tener otro hijo enfermo aumenta varias veces.

La razón es una violación de la secuencia de cromosomas en una sección particular del ADN. Estas enfermedades incluyen:

  • fibrosis quística,
  • sindrome adrenogenital
  • fenilcetonuria
  • hemofilia
  • anemia de células falciformes,
  • Síndrome de Vernig-Hoffman.

Ventajas y riesgos del método.

El diagnóstico genético previo a la implantación, cuyas revisiones se consideran ambiguas, tiene ciertas ventajas en el campo del cribado prenatal:

  • Sólo los embriones de alta calidad y saludables se transfieren al útero,
  • disminuye el riesgo de tener un bebé con anomalías genéticas,
  • doble el riesgo de aborto involuntario,
  • se duplicó el riesgo de fertilidad múltiple,
  • la posibilidad de implantación de embriones aumenta en un 10%,
  • 20% de aumento en la probabilidad de un nacimiento exitoso de un bebé.

El riesgo de daño accidental al embrión con PGD es del 1%. La probabilidad de un resultado erróneo es de 1:10, además, el 3% de la posibilidad de que un embrión con cualquier anomalía se considere saludable.

La probabilidad de que un embrión sano se desvíe por los resultados es de 1:10. La posibilidad de 1: 5 de que la transferencia de embriones al útero se cancele debido a las anomalías encontradas en cada uno de ellos.

Contraindicaciones

El diagnóstico genético previo a la implantación (PGD), cuyas consecuencias para el embrión no se han identificado con precisión, tiene varias contraindicaciones para:

  • fragmentación del embrión de más del 30% (la formación de fragmentos de hasta el 25% se considera normal),
  • la presencia de blastómeros multinúcleo en el embrión,
  • El embrión tiene menos de 6 blastómeros en el tercer día de su desarrollo.

Método de seguridad

El diagnóstico se lleva a cabo en una etapa temprana en la creación de un organismo futuro, cuando todas sus células son polipotentes, es decir, se puede formar un organismo sano en toda regla a partir de cada uno.

Todas las etapas en curso de PGD no causan tiempo para el embrión, el feto y el feto. Una vez obtenida la muestra para el estudio, se prepara de forma especial. Las células se colocan en un portaobjetos de vidrio en el que se fijan, o en una solución tampón.

Costo del procedimiento

A primera vista, el diagnóstico genético previo a la implantación, cuyo costo varía de 50 a 120 mil rublos, parece ser una manipulación costosa. Sin embargo, la salud y el tratamiento de un niño con patologías genéticamente determinadas costarán mucho más.

El procedimiento ofrece todas las ventajas sobre las mujeres que podrían concebir un hijo de una manera natural, ya que este método de diagnóstico no está disponible para ellas. El diagnóstico genético previo a la implantación, cuyo precio es escaso en comparación con la fertilización in vitro en sí, sirve solo como un complemento al programa general, que permite no solo dar a luz y dar a luz, sino también criar a un bebé sano.

¿Cómo se heredan las enfermedades genéticas?

No todas las mutaciones o signos defectuosos en los padres pueden causar manifestaciones de la enfermedad en un niño. Todo depende de si el rasgo dominante o recesivo se hereda de cada cónyuge y de la combinación de genes que tendrá el niño.

Si un gen que domina un similar sin cambios se transmite a un niño, existe un riesgo del 50% de que se manifieste una patología hereditaria. Los padres con un gen de la enfermedad recesiva tienen un rasgo genético doloroso. Para que un niño desarrolle síntomas clínicos de patología, debe heredar dos genes recesivos.

También hay enfermedades relacionadas con el sexo. En las mujeres, el vigésimo tercer par de cromosomas es XX, en los hombres, XY. Si en el material genético de una mujer uno de los cromosomas es defectuoso, entonces debido al segundo, se bloquea el desarrollo de la enfermedad, pero está presente un portador del gen patológico. En los hombres, el cromosoma Y no puede bloquear los efectos del cromosoma X patológico, por lo que la enfermedad se manifiesta en los hijos de tal par, y las hijas en el 50% son portadoras del gen alterado.

El diagnóstico genético preimplantacional de los embriones ayuda a determinar con una precisión del 100% en qué combinación se heredó el material genético, el niño manifiesta la enfermedad o será el portador de signos patológicos.

¿Quién necesita realizar una investigación genética?

Para PGD hay ciertas indicaciones. Se recomienda realizar un estudio para mujeres que desean dar a luz después de 34 años. A esta edad, incluso con la aparición natural del embarazo, aumentan los riesgos de tener un bebé con anomalías genéticas.

Los ovocitos envejecen gradualmente, están expuestos a una variedad de factores negativos a lo largo de sus vidas:

  • malos hábitos de la madre (fumar, beber alcohol),
  • enfermedades crónicas
  • tratamiento con drogas,
  • Condiciones de trabajo nocivas (reactivos químicos, factores físicos en forma de altas temperaturas, vibración, radiación ionizante, campos electromagnéticos).
  • mala ecología

Con la edad, los huevos defectuosos se acumulan, lo que aumenta el riesgo de transmitir genes patológicos a la progenie. Si tal embrión se transfiere al útero, en la mayoría de los casos no arraigará, el embarazo se verá interrumpido por un aborto espontáneo. O, si el embarazo avanza, el examen posterior revelará una patología que se convertirá en una indicación de interrupción. El diagnóstico de preimplantación ayuda a evitar el trauma psicológico asociado con el aborto espontáneo o el nacimiento de un niño inferior. Un hombre cae en el grupo de edad de riesgo mayor de 39 años. Esto incluye a los cónyuges con la patología de la espermatogénesis.

Las mujeres con aborto involuntario habitual también se recomienda PGD. Uno de los padres puede tener un defecto en los cromosomas, que afecta el desarrollo del embrión y conduce a un aborto espontáneo.

Asegúrese de encuestar a las parejas que tienen una patología autosómica dominante. Sus hijos en el 50% serán portadores de un gen o con signos clínicos de enfermedad.

También realizar investigaciones con:

  • 2 o más intentos fallidos de FIV,
  • 3 o más intentos de transferir embriones de alta calidad en mujeres menores de 35 años, que no terminaron en el embarazo,
  • grupo de riesgo para enfermedades de inicio tardío,
  • el deseo de tener un hijo compatible con el sistema HLA para obtener células madre para el tratamiento de otro niño con una enfermedad grave,
  • Nacimiento de un niño compatible con el factor Rh para la prevención de conflictos.

Realizado de acuerdo con las indicaciones, la PGD ayuda a evitar el diagnóstico prenatal posterior, la amniocentesis, que reduce el riesgo de aborto.

Objetivos del estudio.

En función de las indicaciones para el diagnóstico, puede definir sus objetivos:

  1. Exclusión de embriones con un cariotipo anormal.
  2. Establecer las causas de la implantación fallida durante la FIV previa.
  3. Reduciendo el riesgo de tener un bebé con anomalías de los padres padres.
  4. Identificación de embriones con predisposición a enfermedades graves.
  5. Tener un hijo que sea compatible con HLA para el tratamiento de un hermano o hermana.
  6. Reducir el riesgo de enfermedad hemolítica en el nacimiento de un niño con cierto factor Rh.

El diagnóstico genético preimplantacional de enfermedades monogénicas se realiza para identificar:

  • fibrosis quística,
  • Enfermedad de Tay-Sachs,
  • hemofilia A,
  • Miodistrofia de Duchenne,
  • anemia de células falciformes.

La búsqueda de anomalías cromosómicas incluye el estudio de nueve de ellas, que son la causa de los siguientes síndromes:

  • Abajo (trisomía 21 cromosomas),
  • Patau (13 cromosoma),
  • Edwards (18),
  • Shereshevsky-Turner,
  • Klinefelter,
  • "Alumnos felinos" (22),
  • cromosomas 15, 16, 17.

Además, la búsqueda genética le permite identificar muchas otras enfermedades.

Tecnicas de diagnostico

Para PGD, se utilizan embriones o huevos. Pero en el primer caso, el estudio es más informativo, ya que El embrión tiene el material genético del padre que puede transmitir genes defectuosos.

En el estudio realizar una biopsia de un blastómero en un embrión de 4-10 existente, que se encuentra en la etapa de aplastamiento. Esto sucede durante 3-5 días. No se aplica ningún daño al futuro feto.

La técnica solo se puede utilizar en el procedimiento de FIV, combinada con ICSI: inseminación artificial con esperma. Esto se hace para que en el proceso de biopsia del blastómero, el material genético del espermatozoide que no estuvo involucrado en la fertilización no se tome para estudio.

La transferencia de embriones y el manejo del embarazo continúan como en la FIV normal. Solo se asignan 2 días para el análisis, la replantación debe realizarse a más tardar a los 5 días de desarrollo. Más oportunidades de diagnóstico en el ciclo con crioconservación. Si realiza una biopsia de algunos embriones y luego los conserva, puede realizar la investigación lo más segura posible y, para el siguiente ciclo, volver a plantar un embrión de alta calidad.

Desarrolló varias técnicas para PGD.

Utilizado para el diagnóstico de cambios cromosómicos numéricos o estructurales - aneuploidía y translocaciones. La célula obtenida por biopsia se fija en un portaobjetos, se calienta y se enfría. Cuando esto ocurre, la ruptura de su caparazón y la liberación del citoplasma. Los segmentos de ADN están marcados con sondas fluorescentes - tintes especiales. Además, en un microscopio de fluorescencia especial, puede contar cromosomas específicos, identificar normal y patológico.

La reacción en cadena de la polimerasa se basa en la identificación de copias de ADN específicas. Para empezar, se desnaturaliza para desenrollar el hilo doble y obtener un fragmento. Al agregar enzimas especiales, la cantidad de material genético se duplica gradualmente. Esto le permite detectar sitios defectuosos en el nucleótido. La técnica se utiliza para buscar enfermedades monogénicas, cuando uno o dos cónyuges se definen como portadores de genes defectuosos o con signos clínicos de la enfermedad.

  • La última técnica de NGS.

Una innovación es el diagnóstico genético de preimplantación en el cryocycle por el método NGS, con la ayuda de la cual es posible estudiar los 23 pares de cromosomas. Su precisión alcanza el 99,9%. Al mismo tiempo, se está realizando un estudio de patologías monogénicas y cromosómicas, así como mutaciones. La técnica permite distinguir translocaciones equilibradas del conjunto normal de cromosomas. Por lo tanto, no es necesario repetir la biopsia de los blastómeros. La alta automatización de procesos elimina errores adicionales.

Beneficios y riesgos

El uso de un análisis genético del embrión en la etapa de escisión aumenta las posibilidades de una implantación exitosa. Se ha demostrado que los cambios cromosómicos en el embrión aumentan la probabilidad de aborto involuntario en el período temprano, la formación de un embarazo no en desarrollo. В 21% случаев самопроизвольного прерывания беременности, в том числе полученной методом ЭКО, причиной прерывания становится хромосомная патология плода. С возрастом количество аномалий увеличивается в геометрической прогрессии.Si consideramos que las mujeres de la categoría de mayor edad suelen recurrir a tecnologías de reproducción asistida, queda claro que los diagnósticos deben realizarse antes de la replantación de embriones.

La información obtenida puede ser utilizada por el médico durante otros intentos de FIV, así como sugerir las razones de los intentos fallidos anteriores de fertilización.

Cuando se usa la PCR o un método fluorescente, solo se puede examinar un cierto número de cromosomas. Por lo tanto, algunos defectos pueden ser heredados.

Sucede que durante el diagnóstico genético previo a la implantación, un embrión anormal se define como normal. En este caso, el diagnóstico prenatal posterior ayudará a diagnosticar con precisión la patología. En esta etapa de desarrollo de la ciencia, PGD no puede reemplazar completamente a esta última. A veces las anomalías genéticas están formadas por un mosaico. En este caso, una biopsia de un blastómero confirmará el estado normal del embrión y la enfermedad surgirá de la falla de la célula alterada.

El daño del embrión durante la biopsia es extremadamente raro, en el 0,1% de los casos. También se debe recordar que incluso después de un diagnóstico y replantación exitosos de un embrión normal, la FIV puede fallar por razones desconocidas. En este caso, la causa puede ser trastornos inmunes en el cuerpo de la madre, enfermedades no diagnosticadas. Sólo un examen completo en términos de preparación para la FIV, un estilo de vida saludable aumenta las posibilidades de quedar embarazada.

El contenido

La idea del diagnóstico genético previo a la implantación apareció antes del nacimiento del primer niño de FIV. En 1967, un artículo fue publicado por R. Edwards (R. G. Edwards) y R. Gardner (R. L. Gardner) sobre la realización de una biopsia de embriones de conejo para la determinación del sexo antes de la implantación, en la que los autores predijeron la aparición de tecnologías similares en humanos [2]. Sin embargo, los diagnósticos genéticos de preimplantación en humanos solo fueron posibles a principios de los años 90, cuando se logró un nivel tecnológico suficiente de fertilización in vitro y se desarrolló una reacción en cadena de la polimerasa, lo que permitió el análisis de ADN en células individuales.

En 1989, el primer intento exitoso de determinar el sexo se llevó a cabo mediante el análisis de PCR del blastómero tomado del embrión en la etapa de aplastamiento (6-8 blastómeros) [3]. Las primeras entregas exitosas después de un procedimiento similar en parejas con riesgo de enfermedad recesiva ligada al X tuvieron lugar en 1990 [4].

En 1990, se diagnosticó una enfermedad monogénica antes de la fertilización, y la técnica incluyó un análisis de PCR de células de óvulos polares [5].

El primer nacimiento de un niño después del diagnóstico por PCR preimplantacional de una enfermedad monogénica (fibrosis quística) tuvo lugar en 1992 [6].

Posteriormente, se utilizó la hibridación fluorescente in situ (FISH) para determinar el sexo del embrión, así como las anomalías cromosómicas. A partir de 2012, el método FISH para determinar las anomalías cromosómicas se reemplaza gradualmente por la hibridación genómica comparativa. El método de la PCR sigue siendo indispensable para el diagnóstico de enfermedades monogénicas.

El diagnóstico genético previo a la implantación está indicado para parejas que tienen un portador de reordenación cromosómica o una enfermedad monogénica. Los ejemplos de enfermedades monogénicas incluyen fibrosis quística, enfermedad de Tay-Sachs, anemia de células falciformes, hemofilia A, distrofia muscular de Duchenne y muchos otros.

Además, el diagnóstico genético previo a la implantación se realiza en parejas con un mayor riesgo de anomalías congénitas en los niños, que no está asociado con el transporte de mutaciones diagnosticadas. Tales casos incluyen parejas donde la edad de la madre es mayor de 35 años, cuando la edad del padre es mayor de 39 años, si el padre tiene espermatogénesis severa, parejas con aborto espontáneo, parejas con repetidos intentos fallidos de FIV.

En el caso de un mayor riesgo indefinido de tener un bebé con anomalías congénitas, el diagnóstico genético preimplantacional se realiza para los nueve cromosomas que están asociados con las enfermedades congénitas más comunes. Estos son el cromosoma 13 (síndrome de Patau), el cromosoma 15 (síndrome de Prader-Willi), el cromosoma 16, el cromosoma 17, el cromosoma 18 (síndrome de Edwards), el cromosoma 21 (síndrome de Down), el cromosoma 22 (síndrome de "pupila de gato") y también el sexo. cromosomas X e Y (diversas anomalías numéricas, incluido el síndrome de Shereshevsky-Turner y el síndrome de Kleinfelter).

El diagnóstico genético previo a la implantación se realiza en algunos casos no relacionados con la posible patología genética del feto; el propósito de dicho diagnóstico es el nacimiento de un niño con ciertas características genéticas. Tales casos incluyen, por ejemplo, diagnósticos genéticos preimplantación, realizados para prevenir el conflicto de rhesus.

Hay casos en que se combinan varios requisitos previos para el diagnóstico genético preimplantacional. Un ejemplo es el caso cuando, utilizando un diagnóstico genético preimplantacional, un donante compatible con HLA para la terapia celular de la anemia de Fankoni nació en un proband [7]. En este caso, se excluyó la anemia de Fanconi y se seleccionó el tipo de histocompatibilidad deseado.

Realizar el diagnóstico de preimplantación solo es posible en el marco del ciclo de tratamiento de la FIV, o más bien, la fertilización in vitro con inyección intraplasmática de espermatozoides (ICSI), es decir, el espermatozoide se inyecta en el huevo "manualmente" con la ayuda de instrumentos microquirúrgicos. El procedimiento ICSI es necesario debido al hecho de que en la FIV normal se agrega una gran cantidad de espermatozoides a la célula del óvulo. Luego, cuando se recolectan cuerpos polares o blastómeros, existe el riesgo de que el material genético del espermatozoide que no participó en la fertilización se incorpore al análisis con la célula embrionaria.

La preparación para el ciclo de tratamiento y el ciclo de tratamiento de FIV con PGD en sí no difiere mucho del ciclo de tratamiento de FIV habitual:

  1. una mujer recibe medicamentos hormonales para estimular la superovulación,
  2. Se realiza punción transvaginal del folículo,
  3. La fertilización de los óvulos con esperma se realiza en el laboratorio de embriología.
  4. La transferencia de embriones al útero tarda 5-6 días.

Si un trastorno genético se hereda de una mujer, los embriones "sanos" se pueden seleccionar al pasar el procedimiento de prueba solo a los cuerpos polares, sin tocar el embrión en sí. También puedes probar solo blastómeros. O se puede llevar a cabo un estudio secuencial de cuerpos polares, y luego blastómeros.

El tipo de esquema de PGD que se aplicará para cada caso específico se determina en la consulta con un médico genético o un consultor de PGD especialmente capacitado al planificar PGD.

En la primera división de la meiosis, el ovocito de primer orden se divide, lo que da como resultado la formación de un ovocito de segundo orden y un pequeño cuerpo de primera reducción (ambas células con un conjunto de cromosomas haploides). En la segunda división de la meiosis, como resultado de la división de un ovocito de segundo orden, se forman una célula de huevo y el segundo cuerpo de reducción. El primer cuerpo de reducción a veces también se divide en dos células pequeñas idénticas. Como resultado de estas transformaciones del ovocito de primer orden, se forman una célula de huevo y tres cuerpos de reducción, donde tanto la célula de huevo como los cuerpos de reducción tienen un conjunto de cromosomas haploides. Por lo tanto, es posible investigar los cuerpos polares para establecer si el huevo ha heredado un defecto genético.

Después de la fertilización de los óvulos con esperma en el laboratorio de embriología, el embrión se desarrolla: las células se dividen. En el tercer día, el embrión consiste en 6-8 blastómeros. Y en el tercer día, se recopila material biológico para la investigación genética, la llamada "biopsia de embrión", es decir, la extracción de un blastómero del embrión (y en ocasiones también de los cuerpos polares) con la ayuda de microtools especiales. El procedimiento no viola el desarrollo posterior del embrión. Mientras se realizan los diagnósticos genéticos, los embriones continúan desarrollándose en un medio de cultivo apropiado hasta que se transfieren al útero en el quinto día de desarrollo. En este momento, el embrión debe alcanzar la etapa de blastocisto.

Antes de la transferencia, el embriólogo evalúa la estructura y la forma de los embriones. El resultado del diagnóstico genético se compara con la morfología de los embriones y se llega a una conclusión sobre qué embriones se recomiendan para la transferencia al útero. Para la transferencia, los embriones con las mejores características morfológicas se seleccionan sin trastornos genéticos.

El análisis se realiza en muy poco tiempo. Solo 2 días están disponibles para el análisis de blastómeros, ya que el embrión no puede continuar su desarrollo fuera del cuerpo de la madre más allá de la etapa de blastocisto (quinto día después de la fecundación), por lo tanto, el estudio debe realizarse en este corto tiempo.

Un enfoque alternativo es llevar a cabo PGD en el cryocycle. En este caso, se realiza una biopsia en el quinto día de desarrollo, e inmediatamente después de ello, los embriones se someten a una crioconservación. En el mes siguiente, se realiza un diagnóstico genético y los embriones recomendados sin mutaciones se transfieren al útero durante el próximo ciclo. La práctica de un ciclo desconectado tiene varias ventajas: menos riesgo de sobreestimulación, más material y tiempo para el análisis, menos procedimiento traumático para la biopsia de embrión. La desventaja de un cryocycle es un tiempo mayor desde el inicio de la estimulación hasta la transferencia de embriones [1].

  1. Para anomalías cromosómicas numéricas y estructurales, se utiliza FISH (hibridación fluorescente in situ). Suele llevarse a cabo para el análisis de trastornos numéricos de tres, cinco o siete cromosomas, con mayor frecuencia los cromosomas 13, 18, 21, X e Y.
  2. Una alternativa moderna al método FISH es la hibridación genómica comparativa en microchips (GHS). GHS le permite probar todos los cromosomas al mismo tiempo.
  3. Cuando se realiza una PGD de enfermedades monogénicas, se utiliza el método de PCR.

Método de hibridación fluorescente in situ (FISH) es un método de análisis citogenético utilizado para identificar y localizar secuencias específicas de ADN en cromosomas en metafase y en núcleos de interfase. Este método utiliza sondas de ADN, que son una secuencia de nucleótidos de tamaño limitado que es complementaria de una región específica de ADN nuclear. La sonda lleva una "etiqueta", es decir, contiene nucleótidos asociados con el fluoróforo (una molécula capaz de fluorescencia). Después del procedimiento de hibridación en el caso de la formación de una molécula de ADN híbrida de una sonda y un ADN diana en una preparación citogenética en estudio, se puede observar la luminiscencia de secuencias específicas de ADN en los cromosomas o núcleos utilizando un microscopio de fluorescencia.

La reacción en cadena de la polimerasa es un método basado en la copia selectiva múltiple de una determinada sección de ADN que utiliza enzimas en condiciones artificiales (in vitro). Cuando esto sucede, solo se copia el área que cumple con las condiciones especificadas, y solo si está presente en la muestra en estudio.

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